МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ В ПЛОДОВО-ЯГОДНЫХ СОКАХ И ВИНАХ

 

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ В ПЛОДОВО-ЯГОДНЫХ СОКАХ И ВИНАХ (Утверждены заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 15 декабря 1977г.)

Метод разработан в Институте питания АМН СССР И. М. Скурихиным и О. Э. Линке и рекомендован для использования в санитарно-эпидемиологических станциях, на предприятиях пищевой промышленности и в научно-исследовательских организациях.

Предлагаемый метод позволяет проводить определение щавелевой кислоты в плодово-ягодных соках и винах в присутствии винной и лимонной кислот.

Реактивы

1.             Реактив для осаждения щавелевой кислоты состоит из двух растворов:

а)             25 г безводного хлористого кальция помещают в мерную колбу на 500 мли растворяют в небольшом количестве воды (50-60 мл) и доливают до метки50%-ной уксусной кислотой;

б)             330 г кристаллического уксуснокислого натрия (CH3COONa« ЗН, О) растворяют в 300 мл воды; оба раствора смешивают и оставляют на двое сутокпри температуре 3-7° С и затем фильтруют.

1. Борная кислота.
2. 0,1 и. раствор перманганата калия.
3. 1%-ный раствор щавелевой кислоты.
4. 10%-ный раствор аммиака.
5. 1%-ный раствор азотнокислого серебра.

Аппаратура

1. Водная баня.

2. Электроплитка.

3. Бюретка на 5 мл.

4. Мерная колба на 500 мл.

5. Колба коническая на 250 мл.

6. Химические стаканы на 100 мл.

7. Пипетки на 5 и 50 мл.

8. Химические воронки диаметром 8—10 см.

9. Фильтры бумажные типа «синяя лента».

10.           Бумага универсальная индикаторная.

Подготовка пробы

Отбирают 70-100 мл сока или вина и тщательно фильтруют через плотный фильтр (типа «синяя лента») до полной прозрачности. Слабоокрашенные соки и вина после фильтрации непосредственно используют для анализа. В случае анализа труднофильтруемых соков их разбавляют дистиллированной водой в 5 раз, что учитывается в дальнейших расчетах.

Темноокрашенные соки и вина (из вишни, черники, ежевики) после фильтрации разбавляют в 2-5 раз, что учитывается в дальнейших расчетах до получения слабо-розовой окраски.

Сульфитированные соки и вина при содержании общей сернистой кислоты выше 30 мг/л после фильтрации дисульфитируют путем упаривания на водяной бане до половины объема с последующим доведением до исходного объема дистиллированной водой. Если при этом образцы помутнеют, то их подвергают повторной фильтрации.

246

. Для определения необходимости разбавления или упаривания проводят контрольное определение с добавкой известного количества щавелевой кислоты (например, к 50 мл исходного образца добавляют 1-5 мл 1 н. раствора щавелевой кислоты в зависимости от предполагаемого разбавления) по прописи, описанной ниже в разделе «Ход анализа».

Если добавка определяется с ошибкой более ±10% относительных, то это говорит о необходимости разбавления или упаривания.

Правильность проведения разбавления (при анализе окрашенных образцов) определяется опытами с добавкой известного количества щавелевой кислоты.

Ход анализа

Для осаждения щавелевой кислоты в колбу на 250 мл берут 50 мл сока или вина подготовленных, как указано выше, прибавляют до слабощелочной реакции (рН 8 по индикаторной бумаге) аммиак и 1-2 г борной кислоты (последнюю добавляют для затруднения осаждения солей лимонной, а также винной кислот) и взбалтывают до полного ее растворения. Затем добавляют 10 мл реактива для осаждения щавелевой кислоты и оставляют на 48 ч при температуре 3-7°С или на ночь (не менее 16 ч) при 0° С. Выпавший осадок щавелевокислого кальция отфильтровывают на бумажном фильтре и промывают горячей (70—90° С) водой до отрицательной реакции на хлор (отсутствие осадка от прибавления нескольких капель 1%-ного раствора азотнокислого серебра).

Промытый осадок щавелевокислого кальция осторожно смывают водой с фильтра из промывалки в колбу и затем промывают фильтр 10-15 мл горячей (70-90° С) 10%-ной серной кислотой в эту же колбу, чтобы растворить следы оксалата, оставшиеся на фильтре. Осадок в промывной колбе растворяют при легком перемешивании. При затруднении растворения осадка колбу нагревают. Затем фильтр дополнительно промывают 20—30 мл горячей воды и полученный фильтрат титруют 0,1 н. раствором перманганата калия до появления розовой окраски. Зная, сколько миллилитров перманганата калия идет на титрование взятой пробы, и зная титр перманганата калия по щавелевой кислоте, узнают количество кислоты в граммах.

Расчет

Содержание щавелевой кислоты в г/л безводной кислоты (X) находят по формуле

Х=а° 0,0045 -20,

где а — количество миллилитров 0,1 н. раствора перманганата калия, пошедшее на титрование; 20 — пересчет исходного объема на 1 л; 0,0045 — количество кислоты в г, соответствующее 1 мл точно 0,1 н. раствора КМпО4.

Примечание. В случае разбавления сока или вина результаты умножают на соответствующий коэффициент разбавления.

Точность метода ± 10% относительных. Минимально определяемая концентрация 10 мг/л.

Приложение4

Нормы взятия проб пищевых продуктов для проведения ветсанэкспертизы на мясо-молочных и пищевых контрольных станциях

(лабораториях ветсанэкспертизы)

При проведении ветсанэкспертизы и лабораторного исследования отбор проб производят по следующим нормам.

1. Общая масса проб мяса, лимфоузлов, паренхиматозных и других органов жиров топленых, а также рыбы и рыбопродуктов:

247

1 i

туши мяса (говядина, свинина, баранина и др.) до 200 г

кролики, птица, нутрии по показаниям

на биохимическое исследование мяса и мясопродуктов по показаниям

200 г.

Для бактериологического исследования пробы мяса и мясопродуктов отбирают согласно действующим Правилам ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов:

шпик от каждого куска 20 г

жиры топленые животного происхождения 50 г

Отбор проб рыбы производят согласно действующим «Правилам ветеринарно-санитарной экспертизы рыбы и рыбопродуктов на рынках».

2.             Общая масса проб молока и молочных продуктов (г):

молоко.................................................................. 250

творог................................................................... 20

сметана................................................................ 15

масло (сливочное, топленое) ........................  15

кисломолочные продукты (ряженка, ■

йогурт, варенец, мацони и др.) .....................  50

3.             Общая масса проб растительных и других пищевых продуктов (г):

солено-квашеные продукты с рассолом… 500

картофель............................................................ 2-3 клубня

средней величины.

овощи свежие (лук зеленый, петрушка, укроп и др.)              50

овощи сушеные................................................. 50

фрукты свежие................................................... 200

фрукты сушеные............................................... 100

ягоды.................................................................... 100

горох, фасоль..................................................... 50

семена масличных культур........................... 50

масло растительное......................................... 200

мед......................................................................... 100-200

грибы сушеные.................................................. 25

грибы свежие...................................................... отдельные

экземпляры по показаниям

вино       по показаниям 500-1000 мл

арбузы, дыни, помидоры, огурцы, лук реп- по 1 -2 экз. чатый, капуста         средней величины изкаждогоместа (упаковки) попоказаниям

зерно, зернопродукты...................................... 500-1000

крахмал, сахар.................................................. 200

орехи (грецкие, фундук и др.) .......................  200-300

После проведенного исследования остатки проб продуктов подлежат утилизации, на что составляют акт.

* * *

С изданием настоящих Правил отменяются «Правила санитарной экспертизы растительных пищевых продуктов» на мясо-молочных и пищевых контрольных станциях на рынках, утвержденные 30 января 1961 г.

248

ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ АППАРАТОВ (АВТ ИЛИ АВТ-У)

ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ЛИЧИНОК ТРИХИНЕЛЛ ПРИ ГРУППОВОМ МЕТОДЕ ТРИХИНЕЛЛОСКОПИИ СВИНИНЫ

(Утверждена Главным управлением ветеринарии Госагропрома СССР 13 мая 1986 г.)

1. Метод группового исследования свинины на трихинеллез (трихинелло-„скопии) основан на растворении в переваривающей жидкости образцов мышечной ткани и обнаружении в осадке личинок трихинелл.
2. Растворение проб мышечной ткани осуществляют при помощи аппаратов для выделения личинок трихинелл АВТ или АВТ-У. Каждый из этих аппаратов представляет собой термостатирующую камеру с вмонтированными в неетремя (аппарат АВТ-У) или восьмью (аппарат АВТ) реакторами, предназначенными для растворения мышечной ткани в переваривающей жидкости. Реакторыимеют мешалку с индивидуальным приводом от электродвигателя и отстойникдля сбора осадка.

При необходимости увеличения производительности аппарата АВТ-У несколько таких аппаратов могут быть посредством переходных устройств скомплектованы в линию трихинеллоскопического контроля с единой системой электропитания, водоснабжения и удаления отработанного искусственного желудочного сока.

1. Для трихинеллоскопии из ножек диафрагмы каждой свиной туши (на границе перехода мышечной ткани в сухожилие) отбирают пробу мышц массой 1 гпо 0,5 г от каждой из ножек диафрагмы. В групповую пробу массой до 100 гвходит до 100 проб, взятых от свиных туш.
2. Групповую пробу измельчают на мясорубке с механическим или электрическим приводами. Полученный фарш помещают в стакан, маркированныйцифрой, соответствующей номеру реактора.
3. Термостатирующую камеру через патрубок в нижней части стойки аппарата соединяют с сетью горячего водоснабжения и заполняют теплой (40-42° С) водой до ее вытекания через патрубок в днище камеры. После этого аппарат подключают к электросети.
4. Для получения переваривающей жидкости в каждый из реакторов заливают до метки теплую воду (40-42°С), а затем вносят 5 г пищевого пепсинаактивностью 100000 ЕД и 25 мл концентрированной соляной кислоты. Для перемешивания смеси включают мешалку на 1 мин.
5. В реактор с переваривающей жидкостью через заправочный бункер вносят измельченную групповую пробу, включают двигатель мешалки и заводяттаймер поворотом рукоятки вправо до отметки 20 мин. Окончание переваривания пробы определяют по звуковому сигналу таймера, после чего отключаютдвигатель и вновь заводят таймер до отметки 10 мин — времени, необходимогодля отстаивания жидкости.

 

1. После звукового сигнала таймера осторожно открывают зажим отстойника и лунку кювета (емкостью 2 мл) заполняют осадком, образовавшимсяна дне отстойника. Кювет маркирован цифрой, соответствующей номеру реактора. Затем закрывают зажим отстойника и осадок, собранный в кювете, подвергают исследованию на наличие личинок трихинелл.
2. Исследование осадка производят при помощи трихинного микропроектора, бинокулярной лупы или микроскопа.

10.           При выявлении в осадке хотя бы одной личинки трихинелл соответствующую исследованную группу свиных туш переводят на запасной подвеснойпуть, разделяют на подгруппы по 10-12 туш и каждую из них подвергают трихинеллоскопии в соответствии с пп. 5-9 настоящей Инструкции.

Туши из подгруппы, давшей положительный результат при повторной трихинеллоскопии, исследуют индивидуально компрессорным методом для выявления туши, пораженной личинками трихинелл.

С трихинеллезными тушами поступают в соответствии с действующими «Пра-249

вилами ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов».

11.           Однократно использованную переваривающую жидкость применяютдля исследования еще двух групповых проб свинины, если результаты исследований первой, а затем второй групповой пробы были отрицательными. При положительном результате исследования повторное использование переваривающей жидкости не допускается. Отработанную переваривающую жидкость сливают в ванну, а затем в канализацию.

12.           По окончании рабочего дня переваривающую жидкость и воду из термокамеры сливают через ванную в канализацию, после чего реакторы при работающих мешалках через патрубки промьшают горячей водой (50-60°С). При сильном загрязнении вставных сит двигатель отключают, отводят в сторону ось мешалки, снимают крышку реактора, вынимают сита и промывают их 2-3%-нымраствором кальцинированной соды.

После исследования каждой групповой пробы стаканы, кюветы, мясорубку тщательно промьшают горячей водой и только после этого используют в дальнейшей работе.

1. Результаты трихинеллоскопии свиных туш групповым методом регистрируют в журнале установленной формы.
2. Групповой метод трихинеллоскопии свинины целесообразно применятьв зонах, благополучных по трихинеллезу.

ной мышцы или языка. Масса пробы должна быть не менее 5 г от каждой группы мышц, а общая масса проб не превышать 50 г на 1 л ИЖС.

4  1.6.      Отобранную пробу измельчают на мясорубке с диаметром решетки 3-мм, закладывают в колбу и заливают теплым (40—4 2° С) ИЖС. Колбу с исследуемой пробой (пробами) помещают в термостат при температуре 40-42° С на

5  ч, периодически (через 30 мин) перемешивая. Перемешивание прекращают за30 мин до исследования осадка.

 

1.7. По окончании переваривания проб (что определяется по наличию на днеколбы легких, темно-коричневых хлопьев) осторожно сливают 2/3 отработанногоИЖС, а оставшуюся часть через сито и воронку выливают в пробирку-отстойники выдерживают при комнатной температуре 20 мин, при этом сито не должносоприкасаться со стенками воронки. После этого перекрывают резиновую трубкузажимом, отсоединяют пробирку — отстойник и весь осадок исследуют в часовомили на предметном стекле под микроскопом, в трихинном микропроекторе илипод бинокулярной лупой на наличие личинок трихинелл.

1.8. При выявлении личинок трихинелл с инвазированным мясом или мясными продуктами поступают в соответствии с утвержденными Правилами ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарной экспертизымяса и мясных продуктов.

С изданием настоящей Инструкции утрачивает силу «Наставление по применению группового метода исследования свинины на трихинеллез на мясокомбинатах с помощью аппарата для выделения личинок трихинелл (АВТ)", утвержденное Главным управлением ветеринарии Минсельхоза СССР 21 ноября 1980 г. по согласованию с Минмясомолпромом СССР.

МЕТОДИКА ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТРИХИНЕЛЛЕЗА

(Утверждена Главным управлением ветеринарии Госагропрома СССР 16 октября 1986 г.)

1.1.Лабораторная диагностика трихинеллеза основана на растворении в искусственном желудочном соке (ИЖС) измельченных образцов исследуемой мышечной ткани и обнаружении в осадке личинок трихинелл.

1.2.Указанный метод применяют в лабораторной практике:

для исследования на трихинеллез мяса свиней, кабанов, медведей, пушных зверей, морских млекопитающих и других животных, восприимчивых к названной инвазии, а также продуктов, изготовленных из этого мяса;

с целью уточнения диагноза в случае поражения мышечной ткани образованиями, имитирующими личинок трихинелл;

при определении эпизоотической ситуации по трихинеллезу в животноводческих хозяйствах.

1.3. Лаборатория должна быть оснащена термостатом; коническими стеклянными колбами емкостью 0,5-1,0 л; стеклянными воронками емкостью0,5 л, соединенными резиновой трубкой с пробиркой-отстойником емкостью5 мл; штативом для воронок; капроновым ситом полусферической формы сдиаметром ячей 300-400 мкм, диаметр сита по верхней окружности должен бытьна 2-3 мм больше диаметра воронки.

1.4. Для приготовления ИЖС на 1 л теплой водопроводной воды (40-42° С) берут 10 мл концентрированной соляной кислоты и 2 г пепсина пищевого свиного (по ОСТ 49-53-84) или 20 г пепсина медицинского (по Временной фармакопейной статье 42-1000-80).

Срок годности ИЖС не более 8 ч с момента изготовления.

1.5.          Мышечную пробу, подлежащую исследованию на трихинеллез, отбираютиз правой и левой ножек диафрагмы, а при их отсутствии из наружной жеватель

 

СКАЧАТЬ